同一名受检者连续两次抽血,血常规结果里的血小板计数相差近两成,临床一时难以判断。复查采血过程才发现,第一次用的是先抽的促凝管,采样后没有及时混匀,样本里出现了微小凝块,仪器计数受到干扰。检验结果的误差来源中,检验前环节占比相当高,而其中大部分与采集和运输操作有关,并非仪器或试剂的问题。血液样本从受检者血管到检测仪器,中间要经过采血管选择、采集顺序、混匀、放置、运输和离心多个步骤,每一步都有明确的操作要求,偏离要求的后果不一定立刻显现,却会在数据里留下痕迹。
检验前环节对结果的影响分三类。第一类是成分改变,如细胞在体外继续代谢消耗葡萄糖、钾离子从细胞内漏出使血钾假性升高,这类变化随放置时间延长而加重。第二类是干扰,溶血释放的血红蛋白和细胞内成分会干扰比色和电极法测定,脂血造成浊度影响光学检测,黄疸对某些项目也有干扰。第三类是采样误差,输液同侧采血使样本被稀释,压脉带时间过长使局部血液浓缩,混匀不充分产生微凝块堵塞仪器管路。三类问题中,前两类靠规范操作和时间控制来避免,第三类靠流程设计和人员培训来减少,全部依赖事后判断是来不及的。
采集前的准备直接决定样本的基线水平。需要空腹的项目应按要求告知受检者空腹时长,避免因空腹不足或过度空腹造成结果偏离。采血前应让受检者安静休息一段时间,剧烈运动会使肌酶、乳酸和部分激素水平变化,情绪紧张也会影响某些指标。体位对结果有影响,站位与卧位之间的血液浓缩程度不同,需要对比既往结果的指标应保持体位一致。输液中的受检者应避免在同侧肢体采血,必要时在输液暂停一段时间后从对侧采集并记录。采集前核对身份、项目、采血管类型和数量,是防止标本错配的最后关口,核对动作必须实际执行而不是流于形式。
采血管按添加剂和用途区分,选错管型等于样本作废:
多管采集时顺序错误会造成添加剂交叉污染,通行原则是先采集对添加剂污染敏感的项目。通常的顺序是血培养瓶优先,随后是无添加剂的血清管或促凝管,再是枸橼酸钠管,接着是肝素管,之后是乙二胺四乙酸管,最后是含氟化钠或其他添加剂的管型。使用蝶翼针和持针器时,若第一管用于需要精确抗凝剂比例的项目,应考虑先采一管弃去管或使用无添加剂的管排除管路死腔的影响,具体按所用器具的说明执行。采血过程中压脉带使用时间不宜过长,见到回血后及时松开,避免局部淤血和血液浓缩;消毒剂应待其干燥后再穿刺,防止消毒液混入样本影响培养和某些化学测定。
抗凝管采集后必须立即混匀,方法是将管体轻柔地上下颠倒数次,使抗凝剂与血液充分接触,动作要避免剧烈振荡造成溶血。混匀次数不足会出现微凝块,过度振荡会破坏红细胞,两者都会影响结果。促凝管需要按规定静置,使其在合适的温度下充分凝固后再离心,静置时间不足会导致血清中混有纤维蛋白,出现凝块影响检测。运输环节要控制时间和温度,样本应放在密闭容器内直立或按说明放置,避免剧烈颠簸和阳光直射;需要冷藏的项目按温度要求转运,但不得随意冷冻。离心条件包括转速、时间和温度,应按项目要求设定并定期校验离心机,离心后样本避免反复开盖,防止二氧化碳逸出影响血气类结果。
溶血是最常见的样本质量问题,表现为血清或血浆呈红色,原因是采血时负压过大、针头过细、混匀过猛、样本放置时间过长或离心条件不当。溶血后红细胞内的钾、乳酸脱氢酶和部分代谢物释放到血浆中,使这些项目结果假性升高,血红蛋白本身也会干扰比色测定。脂血样本因乳糜微粒造成浊度,影响光学检测并可能干扰电解质测定,严重时需通过高速离心或特殊处理。黄疸样本的高胆红素对某些比色项目有干扰。识别这三类样本,需要在离心后目视检查,并结合仪器给出的样本指数提示,达到一定等级时应记录并按程序处理,必要时要求重新采集,而不是直接出报告。
检验前质控需要设置明确的判定条件:
检验前环节的改进依赖数据。建议记录采集时间、采集人、送检时间、接收时间和样本状态,形成从申请到报告的完整链条;对不合格样本按原因分类统计,定期分析主要类型和发生科室,针对高发问题做定向培训和流程调整;对时间敏感项目设置送检时限提醒,在采集端和检验端同时提示;定期检查离心机、温度记录装置和转运箱的状态,保证设备不成为新的变量。改进动作应可验证,比如调整采集顺序宣教后,凝块导致的拒收率是否下降,用数据确认效果,而不是凭印象判断培训已经到位。
问:采血管混匀要颠倒几次?答:按厂家说明执行,不同管型要求不同,通常抗凝管需要轻柔颠倒数次使添加剂充分接触血液。关键是动作轻柔且充分,不是次数越多越好。剧烈振荡会引起溶血,混匀不足会产生微凝块。实际操作中可以观察管壁是否有残留血液未与添加剂接触,采集后立即混匀比放置后再补混效果更好。
问:样本采集后多久必须送检?答:取决于项目。血糖、血氨、血气等对时间敏感的项目应尽快送检和处理,部分项目要求在很短时间内完成;血常规样本在室温下的稳定性也有限,超过时限会影响细胞形态和计数结果。具体时限应按各项目的技术要求执行,并在采集时就安排好运输衔接,避免样本在护理站长时间滞留。
问:凝血项目采血量不足还能用吗?答:不能。凝血检查用枸橼酸钠抗凝,抗凝剂与血液的比例是固定的,采血量不足会使抗凝剂相对过量,导致凝血时间假性延长,结果不可靠。发现采血量不足应按不合格样本处理,重新采集。采集时应注意观察刻度,采血结束后按要求混匀,避免气泡和溶血。
问:溶血样本一定会影响结果吗?答:取决于项目和溶血程度。轻度溶血对部分项目影响有限,但钾、乳酸脱氢酶、天门冬氨酸氨基转移酶等红细胞内含量高的项目受影响明显,多数比色项目也会受到不同程度干扰。判断时应结合仪器给出的溶血指数和项目特性,超过实验室设定的界限即应拒收或注明干扰情况,不能一概出报告。
问:输液同侧采血为什么不行?答:同侧采血会使样本被输注液体稀释,测得的浓度低于真实水平,对电解质、血糖和药物浓度等项目的干扰尤其明显。若必须在该侧采集,应暂停输液一段时间并充分冲洗管路后再采,且需要在申请单上注明输液信息,供检验人员判断。条件允许时应选择对侧肢体采集。
血液样本的检验前质量,靠的不是某一个环节做得特别好,而是采集、混匀、运输、离心和接收每个环节都守住底线。把管型选择、采集顺序、混匀要求、时限控制和拒收判据固定成可执行、可核查的动作,结果的一致性和可追溯性才有基础。斯特雷克(Streck)在血液学与实验室质控领域提供细胞计数质控品、样本稳定化处理与相关试剂产品,技术资料中包含适用范围、保存条件和操作注意事项。如需质控品配套、样本处理方案或耗材选型的支持,可联系 mro.mobi 平台客服获取资料与报价。
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